D-L1表达和免疫细胞浸润的肿瘤异质性、多样性一直是免疫治疗领域关注的问题。肿瘤转移过程中可能发生肿瘤免疫微环境（TIME）的动态演变。在一定比例的转移性肿瘤（MTs）和相应的原发性肿瘤（PTs）之间，PD-L1表达存在差异。

　　评估MTS与相应PTS的肿瘤免疫背景可能揭示NSCLC转移过程中免疫标记物的变化。一个主要的挑战是，此类研究受到实际临床过程的限制，在实际临床过程中，活检样本可能无法显示令人满意的免疫微环境全景图，这可能导致活检和手术标本之间肿瘤内异质性的偏差。

　　在这项研究中，我们收集了成对的手术切除的原发性和转移性样本，以避免活检中潜在的异质性。我们利用多重免疫荧光（MF）和数字图像分析定量鉴定NSCLC中PD-L1的表达和肿瘤浸润性淋巴细胞（TLL）。

　　28例样本，8例有两处转移，共64个样本。14例肺内转移，22例肺外转移

　　NSCLC原发和转移部位中PD-L1表达和TIL的异质性

　　原发性和转移性NSCLC肿瘤中每个细胞亚群的mIF染色的代表性图像如图1A所示。结果表明，MTs通常在PD-L1+细胞群中具有较高的PD-L1表达水平（p=）和较高的TPS（中位数：%%；平均值：%%，p=）。MTs中较低密度的CD8+CTL（p=）具有显著性差异，但未发现ICs到TCs的空间距离存在统计学差异。使用符号秩检验确定配对PTs和MTs之间定量免疫标记物的异质性。

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